產品描述
DNase Ⅰ(無 RNase)是一種非特異性核酸內切酶,可以將單鏈或雙鏈DNA同等程度進行隨機水解產生具有3′ 羥基和 5′ 磷酸末端的二核苷酸、三核苷酸和寡核苷酸產物。DNase I 可以作用于單鏈 DNA、雙鏈 DNA、染色質和 RNA:DNA 雜交鏈。 鎂離子存在條件下,DNase I可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點;二價錳離子存在條件下,DNase I能將雙鏈DNA同時切斷,使DNA片段化。
不含RNase (RNase free),可以用于各種RNA樣品的處理。
產品性質
來源:攜帶DNase Ⅰ基因的Pichia pastoris分子量:39 kDa比活:2 U/μL比活單位定義:37 ℃條件下,10 分鐘內wan全降解 1μg pBR322 質粒 DNA 所需的酶量定義為 1 個活性單位存儲緩沖液:20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,2 mM CaCl 2 , 2 mM MgCl 2 , 1 mM DTE,0.1 mg/mL Pefabloc SC,50% 甘油,pH 7.6
質量保證
SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶;
2. 酶動力學實時熒光法顯示無RNA酶污染。
產品組分
組分 | 體積 |
DNase I 2U/ul | 500U/250ul ,2000U/1000ul ,10000U/5000ul |
10× Reaction Buffer | 1ml, 5ml , 20ml |
產品應用
體外轉錄后DNA模板的去除;
2. RT-PCR反應前RNA樣品中,去除基因組DNA等可能的DNA污染;
3. Dnase Ⅰ印跡分析;
4. 與DNA聚合酶I一起用于切口平移;
5. 二價錳離子存在條件下,使DNA片段化,產生DNA隨機片段文庫;
6. 細胞凋亡TUNEL檢測中部分剪切基因組DNA作為陽性對照。
應用實例
去除RNA 樣品中污染的基因組DNA
1. 在冰上按照下列表格組分配置反應體系,注意酶的用量可根據實際需要優(yōu)化;
2. 37℃孵育15~20 min;
3. 加入終濃度為 8 mM的EDTA,75℃加熱10 min終止反應。
組分 | 體積 |
DNase/RNase-Free Water Up to | 50 µL |
10× Reaction Buffer | 5 µL |
Total RNA | 10-50 μg |
RNase Inhibitor | 10 U |
DNase I | 2.5~10 U |
Total Volume | 50 µL |
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運輸和保存方法
干冰運輸。-20℃保存,有效期一年。推薦分裝保存,避免反復凍融。
1、酶使用時宜存放在冰盒內或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
2、金屬離子螯合劑,0.1% SDS,DTT,巰基乙醇等對酶有抑制作用。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5、本產品主要用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
78MRNA-1110A | 脫氧核糖核酸酶 I (DNase I) (2U/μL) | 500 U | BIOHUB |
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